Papel fundamental de cFLIP en el control de la apoptosis en células epiteliales de mama

Abstract

TRAIL es un ligando de muerte de la familia de TNF con un gran potencial terapéutico contra el cáncer, debido fundamentalmente a que es capaz de inducir apoptosis en células tumorales sin provocar toxicidad en células normales. Sin embargo, existen algunos tipos de células tumorales, como las de mama, que presentan resistencia a la apoptosis inducida por TRAIL por causas no bien conocidas. En esta tesis se ha estudiado el papel que cFLIP, proteína inhibidora de la apoptosis inducida por ligandos de muerte, juega en la resistencia de células tumorales de mama a la apoptosis inducida por TRAIL. Así, hemos determinado que cFLIP es un componente clave en la resistencia de estas células a TRAIL, puesto que la inhibición de su expresión mediante tratamientos como Doxorrubicina (antraciclina muy utlizada en quimioterapia del cáncer) o SAHA (inhibidor de deacetilasas de histonas), así como el silenciamiento de su expresión mediante oligonucleótidos de ARN de interferencia (siRNA) de cFLIP, sensibilizan a todas las células tumorales de mama testadas a la apoptosis inducida por TRAIL. Además, hemos demostrado que cFLIP es también una proteína clave en la viabilidad de las células epiteliales de mama, tumorales o no, puesto que la inhibición de su expresión induce apoptosis. Esta apoptosis requiere de los componentes de la señalización apoptótica de TRAIL, como son el receptor TRAIL-R2, la molécula adaptadora FADD y la caspasa-8, pero es independiente del propio TRAIL. Por otra parte, y en vista de la importancia de cFLIP en el control de la apoptosis, se ha estudiado la participación de cFLIP durante la morfogénesis de células epiteliales de mama MCF-10A, proceso en el que la apoptosis tiene un papel fundamental. Así una expresión elevada de cFLIPL o de cFLIPS inhibe la formación del lumen de los acinos derivados de dichas células cuando son cultivadas en presencia de matriz extracelular (cultivos 3D). Por otra parte, la inhibición de la expresión de cFLIP impide el desarrollo de acinos, debido probablemente a que las células que no expresan suficientes niveles de cFLIP no son viables. Por ello, el estudio de la regulación de la expresión de cFLIP ha sido de gran interés en este trabajo. Así hemos determinado, que la ruta de señalización PI3K/AKT no es la principal responsable del mantenimiento de la expresión de cFLIP en células tumorales de mama, y apuntamos a que, posiblemente, la ruta de NF-kB sea una de las implicadas en ello. Además, hemos demostrado que el sistema ubiquitina-proteasoma, juega un papel fundamental en la degradación celular de cFLIP y, actualmente, trabajamos en la descripción de la proteína E3-ubiquitin ligasa responsable de la degradación de cFLIP por dicho sistema.