Transformación de olivo con el gen AtNPR1 para inducir tolerancia a patógenos fúngicos

Abstract

El gen NPR1 codifica un componente esencial de la respuesta SAR mediada por ácido salicílico (AS). Tras la infección por el patógeno, la acumulación de AS libera los monómeros NPR1 en el citoplasma, los cuáles son translocados al núcleo activando la expresión de genes relacionados con la patogénesis (PR). La sobreexpresión del gen NPR1 de Arabidopsis thaliana ha incrementado la resistencia a hongos, bacterias y virus, en distintas especies. El objetivo de esta investigación fue sobreexpresar este gen en olivo con objeto de evaluar su efecto en la tolerancia a dos hongos de suelo, el hemibiotrofo Verticillium dahliae (Vd), una de las mayores amenazas del cultivo y el necrotrofo Rosellinia necatrix, un patógeno emergente en nuevas plantaciones. Se obtuvieron 3 líneas transgénicas, a partir de una línea embriogénica derivada de semilla del cv. Picual. Las líneas mostraron diferencias en el nivel de expresión del transgen en hoja, aunque estas diferencias no afectaron a los niveles de actividad endoquitinasa basal, similar a la de plantas control. La respuesta a Vd varió con el patotipo; así, todas las plantas murieron 50 días tras su inoculación con la cepa defoliante (D) V-138. Por otra parte, la respuesta a patotipos no defoliantes (ND) también fue variable, en función de la raza; tras la inoculación con la cepa V1242 (ND, raza 2), los síntomas aparecieron transcurridos 44-55 días, siendo la línea NPR1-780, con mayor expresión del transgen, la que mostró menor índice de severidad de la enfermedad. Esta línea también mostró un comportamiento superior al control tras la inoculación con la cepa V1558 (ND, raza 1), aunque las diferencias no fueron tan acusadas. En la respuesta a R. necatrix, las líneas transgénicas mostraron un ligero retraso en el desarrollo de la enfermedad con valores AUDPC entre 7-15% inferiores al control.