Caracterización molecular y metabólica de la capacidad productora de trimetilamina de bacterias aisladas de muestras clínicas

Abstract

En los últimos años, numerosos estudios han evidenciado que determinadas bacterias de la microbiota intestinal humana poseen la capacidad de transformar determinados constituyentes de la dieta (fosfatidilcolina, colina, betaina y L-carnitina) en trimetilamina (TMA), que una vez absorbida por el hospedador se oxida por los enzimas hepáticos a óxido de trimetilamina, un metabolito que se ha asociado recientemente con la progresión de la arteriosclerosis. En el presente estudio, se han identificado algunas bacterias, aisladas de la microbiota instestinal y urinaria humana, capaces de transformar la L-carnitina en TMA in vitro. Para ello, se ha realizado la caracterización molecular del potencial productor de TMA de 14 cepas bacterianas aisladas de muestras clínicas y comerciales. Dicha caracterización ha consistido en la detección de secuencias homólogas de los genes cntA y cutC en extractos de ADN genómico bacteriano empleando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa y oligonucleótidos degenerados. Además, se ha llevado a cabo la caracterización metabólica de los 14 microorganismos estudiados mediante la evaluación de su capacidad para crecer in vitro en un medio mínimo con L-carnitina como única fuente de carbono. Para confirmar su capacidad productora de TMA in vitro, se ha optimizado un procedimiento de determinación de TMA en el medio de cultivo que consite en la derivatización de la muestra y su posterior análisis mediante electroforesis capilar con detección ultravioleta. Los resultados indicaron que las cepas estudiadas de Klebsiella pneuomoniae son capaces de producir niveles detectables TMA in vitro, mientras que varias cepas de Escherichia coli y la cepa estudiada de Citrobacter youngae no produjeron niveles detectables de TMA in vitro pese a que sí se presentan secuencias homólogas del gen cntA.