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Title

Estudio de las propiedades elásticas de células de cáncer de mama mediante microscopía de fuerza atómica combinada con microscopía de fluorescencia

AuthorsMartínez Gómez, July Esmeralda
AdvisorCalzado-Martín, A.; Calleja, Montserrat
Issue Date7-Jul-2016
PublisherUniversidad Complutense de Madrid
CSIC - Instituto de Microelectrónica de Madrid (IMM-CNM)
Abstract[ES] El citoesqueleto de las células es el principal responsable de la estructura celular y de la localización y transporte de sus orgánulos. En este trabajo se estudia la contribución de dos de sus componentes, la actina y la tubulina, en las propiedades mecánicas de una línea celular epitelial de cáncer de mama mediante el uso de drogas que modifican al citoesqueleto: paclitaxel y blebistatina. El paclitaxel estabiliza los microtúbulos, mientras que la blebistatina inhibe la contracción de la actina. La topografía, la morfología y las propiedades mecánicas de las células vivas se han estudiado mediante microscopía de fuerza atómica en el modo de operación Peak-Force-Tapping® y las modificaciones del citoesqueleto provocadas por los tratamientos se confirman mediante microscopía confocal espectral. El efecto de las drogas se ha observado a nivel morfológico y en las propiedades mecánicas de las células. Nuestros resultados demuestran que mientras que las células sin tratamiento presentan una morfología normal, las células tratadas con fármacos presentan cambios en su morfología. Las células tratadas muestran un aumento en su rigidez cuando se comparan con las células sin tratar, y además vemos que el grado de rigidez depende del tipo de droga empleado, siendo más rígidas las células cuyos microtúbulos se estabilizan mediante el uso de paclitaxel.
[EN] The cytoskeleton is primarily responsible for providing the structural support of the cells, but also for the localization and transport of organelles, and intracellular trafficking. Here we study the contribution of two main components of the cytoskeleton, actin and tubulin, in the mechanical properties of epithelial breast cancer cells by using drugs that modify the cytoskeleton: paclitaxel and blebbistatin. Paclitaxel stabilizes microtubules cytoskeleton, whereas blebbistatin inhibits acto-myosin contraction. Peak-Force-Tapping TM is used here to assess the topography, morphology and mechanical properties of the studied cells and the cytoskeletal changes caused by the treatments are confirmed by spectral confocal microscopy. Untreated cells exhibit a normal morphology, whereas cells treated with the drugs experience changes in their morphology. On the other hand, treated cells show an increase of their stiffness as compared to untreated cells. Furthermore, the degree of rigidity depends on the type of drug used, being stiffer the cells whose microtubules are stabilized by paclitaxel.
URIhttp://hdl.handle.net/10261/182644
Appears in Collections:(IMN-CNM) Tesis
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