Adaptación del método QuEChERS para la detección simultánea de ocho rodenticidas anticoagulantes por HPLC-MS en pequeños volúmenes de higado

Abstract

Los rodenticidas anticoagulantes (ARs) son fácilmente adquiribles en el mercado para el control de plagas de roedores, tanto en zonas rurales como urbanas; lo que puede implicar riesgos para los animales que se alimentan de ellos, a la vez que para los niños cuando se usan imprudentemente. Por otro lado, el análisis de muestras de animales muertos ingresados en centros de recuperación de fauna puede ser una herramienta útil en los programas de monitorización de estos compuestos. En estos casos, el volumen de muestra disponible suele ser pequeño, lo que obliga al uso de técnicas adaptadas capaces de detectar concentraciones traza en estas condiciones. El objeto de este trabajo es la validación de una técnica analítica fácil y rápida, adaptada de la técnica “QuEChERS” para la detección simultánea de 8 rodenticidas anticoagulantes (warfarina, cumatetralilo, difenacoum, brodifacoum, bromadiolona, difacinona, clorofacinona y flocumafen) en muestras de 2 g de tejido. Para la puesta a punto se utilizó hígado de pollo procedente de carnicería para consumo humano. Se llevaron a cabo extracciones utilizando acetonitrilo y sales (sulfato magnésico, cloruro sódico y citrato), para continuar con una purificación con PSA/DSC18, desecación y resuspensión en 1 ml de metanol. Previo a la inyección se acidificó con 10 μl de ácido fórmico. Los extractos obtenidos se analizaron por HPLC-MS. Se utilizó una columna C8 con un flujo de 0,8 ml/min durante 20 minutos. La fase móvil constaba de dos disolventes (A: acetato amónico/agua; B: acetato amónico/metanol). Los valores de recuperación, excepto flocumafen, rondaron entre 44-65%. Si bien estos valores son mejorables, se pueden considerar aceptables por el hecho de tratarse de una técnica multi residuo y obtener unos buenos valores de linealidad (>0,9) y valores de repetitividad y reproducibilidad aceptables (15-29% y 4-21%, respectivamente).