Fator FOXO e Sinalizaçao Nutricional na Reproduçao de Blattella germanica

Abstract

A barata Blattella germanica é um clássico modelo de estudo de vitelogeneses dependente HJ os experimentos realizados com este inseto confirmam que é um inseto anautogenico, sendo que se este não come não se desenvolve seus oocitos Esse animal possui um período de 8 dias como adulto no qual ocorrem transformações reprodutivas, como crescimento dos oocitos e maturação dos mesmo assim como mudanças na alimentação na B. germânica. Tanto a expressão gênica como a reprodução vem sendo bastante estudados nos insetos e os resultados indicam que estes processos passam pela ativação da via do IR e, também, pela ativação da via do gene target of rapamycin (TOR). Ambas as vias estão correlacionadas e sabe se que realizam uma ponte entre o estado larval a ativação metabólica e o crescimento das células. O fator de transcrição FOXO e um dos principais substratos da proteína quinasa Akt em resposta a estimulação celular por fatores de crescimento ou insulina. Com a clonagem de FOXO em B. germânica, com o objetivo obter a seqüência completa e de estudar sua regulação por transcrição, realizamos ciclos de expressão de mRNAs para diferentes tecidos e diferentes fatores da via de insulina FOXO, target of rapamycin (TOR), receptor de insulina (IR), S6K, vitelogenina (Vg), hidroximetilglutamil-CoA sintasa (SIN) e hidroximetilglutamil-CoA-reductasa (RED) em três tecidos diferentes, corpora allata (CA), ovário (OV) e corpo gorduroso (CG), via técnica de RT-PCR e Southern Blot para quantificar a expressão, sendo que os transcritos demonstraram, diferentes padrões de expressão para os diferentes tecidos, assim também analisamos o fator alimentação para diferentes dias de adulto comprovando uma diferente expressão dos transcritos entre animais alimentados e não alimentados. CAPITULO III: Neste capitulo descrevemos um estudo funcional do fator de transcrição FOXO, utilizando a técnica RNAi in vivo. Este trabalho tenta estudar o papel de FOXO durante a fase de ninfa, e sua transição a fase adulta da B. germanica inseto modelo, visto que neste momento de mudança de fases se produzem mudanças morfológicas e fisiológicas importantes. Outro motivo para realizar o estudo seria que quando a B. germânica entra na fase adulta se determina a mudança do programa genético e se inicia uma serie de processos que são exclusivos desta fase. Com o tratamento de fêmeas de B. germânica com dsRNA in vivo para FOXO (DsFOXO) foi possível verificar uma redução dos níveis de mRNAs para FOXO tanto no CG como no OV, o que sugere um efeito sistêmico para o tratamento. O tratamento de DsFOXO, com a condição de presença ou ausência de alimento foi possível observar que, tanto no CG como no OV, a ausência de alimento produziu um aumento de mRNA para FOXO, incluindo no caso de interferir a expressão de FOXO utilizando dsRNA.