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Título

Regulación conformacional del factor de intercambio de nucleótidos de guanina C3G

AutorMartín-Gracia, Beatriz; Carballido Vázquez, Ana M. ; Carabias, Arturo ; Guerrero Arroyo, María del Carmen ; Pereda, José M. de
Fecha de publicación2015
CitaciónXXXVIII SEBBM (2015)
ResumenC3G es un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) que activa las GTPasas R-Ras y Rap1. C3G es esencial en el desarrollo embrionario, basado en su función en adhesión y participa en la regulación de la proliferación, migración y diferenciación celulares. C3G regula el establecimiento de contactos célula-célula asociándose con E-cadherina y activando localmente Rap1 en las etapas iniciales de la formación de uniones adherentes. C3G (120 kD) es una proteína multidominio; en la región amino contiene un dominio de unión a E-cadherina rico en hélices-α, la región central alberga 5 motivos ricos en Pro que median la unión a la proteína adaptadora Crk y, por último, la región C-terminal contiene un dominio REM (Ras exchange motif) seguido de un dominio catalítico GEF de tipo Cdc25H. Recientemente nuestro grupo ha identificado una interacción intramolecular cabeza-cola entre regiones N- y C-terminales que mantienen a C3G en una conformación cerrada. En este trabajo hemos analizado cambios conformacionales en C3G y su relación con la actividad. Para ello hemos empleado sensores conformacionales FRET que incorporan las proteínas fluorescentes CFP y Venus en extremos opuestos de C3G y hemos analizado cambios en la eficiencia de FRET mediante microscopía confocal y técnicas de destrucción fotoquímica (photobleaching) del aceptor. En células COS la cotransfección con Crk causa la traslocación de C3G al aparato de Golgi y una apertura de la molécula. Mutaciones puntuales en C3G que desestabilizan la interacción cabeza-cola resultan en la activación de la ruta de Erk sugiriendo que la actividad GEF sobre Rap1 está autoinhibida en el estado cerrado de C3G.
DescripciónResumen del póster presentado al XXXVIII Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular, celebrado en Valencia (España) del 7 al 10 de septiembre de 2015.
URIhttp://hdl.handle.net/10261/136150
Aparece en las colecciones: (IBMCC) Comunicaciones congresos
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