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Título

Mantenimiento del número de copias del rDNA mediante berreras naturales para el desplazamiento de las horquillas de replicación

AutorOtero-Asman, Joaquín R.; Tenorio-Gómez, María; Gómez-Pamo, Carmen; Krimer, Dora B. ; Schvartzman, Jorge Bernardo ; Hernandez, Pablo
Fecha de publicación2013
CitaciónXXXVI SEBBM (2013)
ResumenLa parada de las horquillas de replicación del DNA o estrés replicativo, constituye una de las causas más importantes de inestabilidad genómica. La colisión del complejo replicativo con la maquinaria transcripcional puede provocar la parada de la horquilla replicativa y, por tanto esta colisión es causa de inestabilidad. Los genes del rRNA (rDNA) constituyen un modelo muy útil para estudiar los conflictos entre replicación y transcripción. En estos genes, organizados en repeticiones en tándem, existen barreras naturales para el movimiento de la horquillas replicativas (RFB) que parecen prevenir la colisión frontal del replisoma con la transcripción. En S. pombe, la actividad de estas barreras requiere de las proteínas de unión al DNA, Reb1 y Sap1, además del complejo Swi1-Swi3. Hemos comprobado que en el mutante nulo swi1∆, las horquillas no son bloqueadas por las RFB, y como consecuencia, éstas continúan, colisionan con la transcripción y se detienen en el extremo 3’ de la región transcrita. La deleción de swi1 también ocasionó una inestabilidad importante de número de copias del rDNA, reduciéndose desde 125 a unas 40 repeticiones por un mecanismo de recombinación homóloga. La reactivación de las RFB mediante la re-introducción el gen swi1 en su locus natural, recuperó el número de repeticiones del rDNA hasta niveles similares a las células wt. Esto indica que las RFB juegan el doble papel de prevenir la inestabilidad del rDNA, evitando la colisión replicación-transcripción, y de recuperar el número de copias cuando éste se aleja del nivel óptimo. Finalmente, nuestros resultados indican que esta alta inestabilidad del rDNA al inactivar las RFB y promover colisión replicación-transcripción, no es sólo consecuencia de la simple parada de las horquillas, dado que cuando se indujo esta parada de la replicación por reducción del pool de dNTPs con hidroxiurea, el efecto sobre la variación del número de copias del rDNA fue relativamente moderado.
DescripciónResumen del trabajo presentado al XXXVI Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular, celebrado en Madrid (España) del 3 al 6 de septiembre de 2013.
URIhttp://hdl.handle.net/10261/136080
Aparece en las colecciones: (CIB) Comunicaciones congresos
(IBFG) Comunicaciones congresos
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