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HIV type 1 group o reverse transcriptases that are active at high temperatures

Other TitlesRetrotranscriptasas del VIH tipo 1 grupo O, activas a temperaturas elevadas
AuthorsMenéndez-Arias, Luis ; Matamoros Grande, Tania ; Abia, David ; Barrioluengo, Verónica
Issue Date20-Nov-2014
CitationWO2014184409 A1
Abstract[EN] The present invention falls within the field of biotechnology. More specifically, the invention relates to reverse transcriptases expressed and purified in bacteria and having the amino acid sequence of the reverse transcriptase of a human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) group O, modified at positions 358, 359 and 360; and variants of this enzyme that contain additional changes at positions 355 and 357 or at 478 or position 69 (in this case accompanied by an insertion of two amino acids). These polymerases have greater activity than the non-mutated enzyme at high temperatures (above 60ºC). In addition, they retain the capacity for DNA synthesis at temperatures greater than 70ºC. Moreover, the copying fidelity of these enzymes is not significantly different from that of the non-mutated reverse transcriptase.
[ES] La presente invención se encuadra dentro del campo de la biotecnología. Más concretamente, se refiere a retrotranscriptasas expresadas y purificadas en bacterias y que tienen la secuencia de aminoácidos de la retrotranscriptasa de un virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1) del grupo O modificada en las posiciones 358, 359 y 360; y de variantes de esta enzima que contienen cambios adicionales en las posiciones 355 y 357 o en la 478 o en la posición 69 (en este caso acompañada de una inserción de dos aminoácidos). Estas polimerasas presentan mayor actividad que la enzima no mutada, a temperaturas elevadas (superiores a 60ºC). Además retienen capacidad de síntesis de ADN a temperaturas superiores a 70ºC. Por otro lado, la fidelidad de copia de estas enzimas no difiere significativamente de la presentada por la retrotranscriptasa no mutada.
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