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Título

Estudio proteómico de la fosforilación de proteínas nucleares inducida por el Acido Retinoico e implicaciones en la funcionalidad celular

AutorLaserna Mendieta, Emilio J.; Valero, L.; Sánchez Del Pino, M.; Michelwski, G.; Cáceres, J.; Barettino, Domingo
Fecha de publicación10-sep-2008
CitaciónXXXI Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular (2008)
ResumenEl Ácido Retinoico (RA) induce en células de neuroblastoma SH-SY5Y la diferenciación neural. Además de sus acciones transcripcionales clásicas regulando la expresión de genes concretos, el RA actúa también de un modo extra-genómico, activando rutas de transducción de señal, como la vía de PI3K/Akt y de la MAP kinasa ERK. Con el objetivo de conocer qué proteínas sufren cambios en su fosforilación como consecuencia de las acciones atípicas del RA, realizamos en años anteriores una primera estrategia proteómica comparando geles bidimensionales de fosfo-proteínas (control y tratadas con RA). Las proteínas diferencialmente expresadas resultaron ser proteínas de unión al DNA (histonas y HMGs) y relacionadas con el procesamiento y transporte del RNA (hnRNPs). Para superar las limitaciones que tiene esta estrategia proteómica tradicional y ampliar los resultados obtenidos, se recurrió a un ensayo LC-MS/MS basado en el iTRAQ, partiendo igualmente de fosfo-proteínas nucleares. El análisis de los resultados ha ratificado la hipótesis inicial, pues entre las proteínas fosforiladas se encuentran entre otras, varias hnRNPs y HMGBs, y familias proteicas implicadas en el splicing, procesamiento post-transcripcional y transporte del mRNA. Tratando de encontrar una contribución funcional a los cambios identificados en la fosforilación de proteínas nucleares, se han realizado experimentos orientados a estudiar su implicación en procesos como el procesamiento y la traducción de los mRNAs. Los experimentos se han centrado en las proteínas SR, factores de splicing ricos en Ser/Arg, en los que la fosforilación puede resultar en una modulación de su actividad. Igualmente, mediante microscopía de fluorescencia, hemos estudiado los efectos de tratamientos cortos con RA en la localización celular de una de las proteínas hnRNP fosforilada, la hnRNP-K.
DescripciónPóster original presentado XXXI Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular, celebrado en Bilbao, 10-13 septiembre, 2008
URIhttp://hdl.handle.net/10261/123181
Aparece en las colecciones: (IBV) Comunicaciones congresos
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