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Rapún-Araiz, Beatriz
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Fernández-Irigoyen, Joaquín
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Martínez, Xabier
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Santamaría, Enrique
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Valle Turrillas, Jaione
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Solano Goñi, Cristina
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García, Begoña
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Lasa, Íñigo
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2016-09
[Introducción] Las bacterias cuentan con diferentes sistemas de transducción de señales para
establecer conexiones funcionales entre las señales ambientales y la fisiología bacteriana.
Los sistemas más utilizados son los basados en procesos de fosforilación asociados a los
sistemas de dos componentes (Two-component system, TCS). Los TCS están formados
por un sensor de membrana o histidine kinase (HK) y un regulador de respuesta
citoplasmático (RR). El número de TCS que contiene una bacteria varía en función del
número de ambientes en los que es capaz de crecer y la complejidad de su diferenciación
celular. En estudios previos, se generó en el laboratorio una cepa de Staphylococcus
aureus deficiente en todos los TCS no esenciales (15) y un conjunto de cepas derivadas,
cada una de las cuales conteniendo un único TCS.
[Objetivo] Identificación del subproteoma regulado por cada TCS de S. aureus.
[Material y Métodos] Para cada una de las 15 cepas de S. aureus que contienen un único TCS se prepararon
extractos de proteínas totales en una condición de crecimiento (TSB, 37ºC, DO 0,8) y se
llevó a cabo su caracterización mediante proteómica diferencial (label-free). Los
resultados obtenidos se compararon con el extracto de proteínas totales de la cepas
salvaje y del mutante deficiente en todos los TCS no esenciales, crecidos en las mismas
condiciones.
[Resultados] En aquellos casos en los que se conoce un fenotipo asociado al TCS se confirmó que la
expresión ectópica de dicho TCS era capaz de restaurar el fenotipo. Este control se
realizó para los sistemas srr, vra, nre, arl y gra.
Los análisis bioinformáticos permitieron caracterizar las proteínas específicamente
afectadas por la expresión de cada TCS. Estas, están implicadas en determinadas
funciones fisiológicas, algunas previamente descritas y otras identificadas por primera
vez.
[Conclusiones] Hemos caracterizado el proteoma dependiente de cada TCS sin las posibles
interferencias causadas por la presencia de otros TCS. Globalmente, los resultados
indican que el número de proteínas específicas para cada TCS es bajo, sin grandes
solapamientos entre los diferentes proteomas caracterizados y sugieren que existe una
especificidad funcional de cada TCS en la regulación de determinadas funciones
fisiológicas.
XI Reunión del Grupo de Microbiología Molecular de la Sociedad Española de Microbiología (2016)
http://hdl.handle.net/10261/148816
Caracterización global del subproteoma regulado por cada sistema de doscomponentes en Staphylococcus aureus