El gen transformer-2 de Anastrepha (Díptera, Tephritidae)

Abstract

El trabajo de esta tesis doctoral se enmarca dentro del estudio de la evolución de los mecanismos de determinación sexual en insectos, utilizando Anastrepha como modelo experimental. El objetivo de la presente tesis doctoral es el aislamiento y caracterización del ortólogo del gen transformer-2 en once especies de tefrítidos pertenecientes al género Anastrepha. La idea es determinar si dicho gen participa en la determinación sexual de estos tefrítidos, y a qué nivel ejercería su función, así como estudiar su evolución. Se ha elegido Anastrepha obliqua como especie de referencia. El gen transformer-2 de Anastrepha obliqua está formado por ocho exones y siete intrones, y se transcribe durante todo el desarrollo y la vida adulta de ambos sexos, incluyendo los ovarios adultos, lo que indica que este gen tiene expresión materna. Codifica una proteína putativa de 249 aminoácidos, la cual posee las características de las proteínas de la familia SR: un dominio RRM de unión al ARN flaqueado por dos dominios SR ricos en dipéptidos arginina-serina. La inyección del dsARN de tra-2 de Anastrepha en huevos de esta especie determina que embriones XX se desarrollen como seudomachos, como consecuencia de la eliminación de la función de transformer-2 endógena. La proteína Tra2 participa en la determinación sexual de Anastrepha a través de su requerimiento para el procesamiento tipo hembra de los transcritos primarios de los genes transformer y doublesex. El gen transformer-2 parece no poseer la función de autorregulación negativa que presenta el gen transformer-2 de Drosophila. Se ha aislado y caracterizado el marco abierto de lectura de otras diez especies pertenecientes al género Anastrepha. La comparación de las proteínas Tra2 de estas especies entre sí y con las proteínas Tra2 de otros insectos, ha puesto de manifiesto que el mayor grado de conservación ocurre en el dominio RRM de unión al ARN y en la región “linker” que une este dominio al dominio RS2 en el extremo carboxilo terminal, mientras que los dominios RS1 y RS2 muestran mayor variación.