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Title

Method of producing recombinant sucrose synthase, use thereof in the production of sucrose-determination kits, method of producing adpglucose and method of obtaining transgenic plants having leaves and reserve organs which accumulate a high concentration of adpglucose and starch

Other TitlesProcedimiento para la producción de sacarosa sintasa recombinante su uso en la fabricación de kits de determinación de sacarosa producción de adpglucosa y obtención de plantas transgénicas cuyas hojas y órganos de reserva acumulen alto contenido en adpglucosa y almidón
AuthorsBaroja-Fernández, Edurne ; Muñoz Pérez, Francisco José ; Pozueta Romero, Javier ; Morán Zorzano, María Teresa; Alonso Casajús, Nora
Issue Date18-Aug-2005
CitationWO 2005075649 (A1)
Abstract[EN] The invention relates to a method for the efficient production of large quantities of soluble recombinant sucrose synthase (SS) in the active form thereof, with the expression of the gene that codes for SS in a strain of Escherichia coli. The expression vector used enables the recombinant SS thus produced to have a histidine tail which facilitates the rapid purification thereof. In addition, the invention relates to sequences of mutated versions of the SS gene, which code for SS isoforms that are suitable for the production of ADPG. The invention also relates to an efficient method for the production of ADPG and UDPG, using the wild and mutated versions of recombinant SS. The invention further relates to the use of SS for the production of sucrose determination test devices. Finally, the invention relates to a method of obtaining transgenic plants which overexpress the SS gene, either constituently or in the reserve organs or leaves thereof, and which have a high concentration (both in the leaves and in the reserve tissues) of sucrose, ADPG, G6P and starch owing to the high ADPG-synthesising activity of SS.
[ES] Se describe un procedimiento de producción eficiente de grandes cantidades SS recombinante soluble en su forma activa, mediante expresión del gen que codifica para la SS en una cepa de Escherichia coli. El vector de expresión utilizado permite que la SS recombinante producida posea una cola de histidinas que facilita su purificación de manera rápida. Asimismo se describen secuencias de versiones mutadas del gen de la SS que codifican para isoformas de la SS adecuadas para la producción de ADPG. Haciendo uso de las versiones "silvestre" y "mutada" de SS recombinante, se describe un método eficiente de producción de ADPG y UDPG. También se describe la utilización de la SS para la producción de dispositivos de ensayo de determinación de sacarosa. Por último se describe la obtención de plantas transgénicas que sobre-expresan el gen de la SS, bien constitutivamente, bien en hojas u órganos de reserva, y que poseen un contenido alto (tanto en hojas como en tejidos de reserva) en sacarosa, ADPG, G6P y almidón como resultado de la alta actividad sintetizadora de ADPG de la SS.
DescriptionFecha de presentación internacional: 27.01.2005. - Titulares: Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC). - Universidad Pública de Navarra
URIhttp://hdl.handle.net/10261/34100
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