Mecanismos diferenciales de incorporación de ADN homólogo y heterólogo en células competentes de Bacillus subtilis

Abstract

Durante el proceso de transformación genética, el ADN donador se une, penetra y se expresa en la población bacteriana receptora que se encuentra en estado de competencia (Lacks, 1977). En los últimos años se ha conseguido separar experimentalmente las primeras etapas de este proceso, tanto en el sistema de Streptococcus pneumoniae (Seto y cols., 1975; Lacks, 1977) como en el de Bacillus subtilis (Buitenwerf y Venema, 1878; García y cols., 1978). Así, durante la etapa de unión, el ADN se asocia a la superficie externa de las células competentes, siendo accesible a la acción de la desoxirribonucleasa (DNasa) pancreática. Posteriormente, una de las hélices del ADN penetra en las células a medida que la otra hélice es degradada por nucleasas celulares dependientes del magnesio (Lacks, 1977). Durante esta etapa, el ADN donador no puede ser eliminado por la adición de DNasa I.

En trabajos previos realizados en nuestro laboratorio (López y cols., 1977; López, 1978; García y cols., 1978) hemos puesto a punto un procedimiento que permite que el ADN homólogo se una normalmente a las células receptoras sin que exista posterior penetración. Este método consiste, esencialmente, en la omisión de los cationes de magnesio del medio de cultivo donde se desarrolla la competencia. No obstante, quisimos comprobar si dicho fenómeno se producía también cuando el ADN donador provenía de un bacteriófago, con el fin de determinar si las primeras etapas de la transformación (ADN cromosómico) y de la transfección (ADN fágico) eran comunes. De esta forma, en el presente trabajo estudiamos la unión, incorporación y expresión de ADN homólogo y fágico en medios de competencia suplementados o no con Mg2+.