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Title

Análisis de los cambios en la fosforilación de proteínas inducidos por Acido Retinoico en células de Neuroblastoma

AuthorsLaserna Mendieta, Emilio J.; Masiá, Susana ; Barettino, Domingo
Issue DateSep-2005
CitationXXVIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular (2005)
AbstractEl Acido Retinoico (RA), la forma activa de la vitamina A, induce en células de neuroblastoma SH-SY5Y la diferenciación neural. Los efectos del RA están mediados por su Receptor RAR, que pertenece a la superfamilia de los Receptores Nucleares de Hormonas. Además de sus acciones transcripcionales clásicas regulando la expresión de genes concretos, el RA actúa también de un modo extra-genómico, modulando la actividad de rutas de transducción de señal. El tratamiento con RA activa, entre otras la vía de señalización, PI3K/Akt, cuya activación por RA es un requisito para la diferenciación neural (López-Carballo G. et al., J. Biol. Chem. 277, 25297-25304, 2002). Estamos interesados en conocer cuáles son las dianas de estas acciones extra-genómicas del RA en células de neuroblastoma, y que influencia pueden tener sobre la respuesta transcripcional a RA. Para ello hemos iniciado un abordaje proteómico, basado en el hecho de que el resultado final de estas acciones extra-genómicas debe ser un cambio en los patrones de fosforilación de proteínas específicas. Para ello realizamos un enriquecimiento en proteínas fosforiladas a partir de extractos nucleares o celulares totales de células control y tratadas con RA, mediante cromatografía de afinidad. Estos extractos enriquecidos en proteínas fosforiladas son separados mediante electroforesis bidimensional (IEF/SDS-PAGE), y los geles son analizados y comparados informáticamente para identificar las bandas expresadas diferencialmente en ambas condiciones. Finalmente, las manchas identificadas son aisladas del gel, digeridas con tripsina y analizadas mediante espectrometría de masas (MALDI-TOF y LC/MS/MS).
DescriptionPóster original presentado XXVIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular, celebrado en Zaragoza, septiembre, 2005
URIhttp://hdl.handle.net/10261/123190
Appears in Collections:(IBV) Comunicaciones congresos
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